實驗室檢驗分析中40個小經驗

2022-10-14 16:27:39 admin

檢驗一些不易溶解的樣品時，采用超聲波超聲可使樣品溶解更快速更徹底，主成分溶解完全，沒有浪費，對含量均勻度測定沒有影響，且簡單方便且更合理；

乙醇作為溶劑溶解主成分時，不能溶解輔料，需要過濾。采用離心方法使輔料沉淀，取上清夜。（注意，有很多離心管不具塞子，可用柔軟的塑料薄膜袋扎橡皮筋做塞子。沒有塞子離心，偏差可達5％），與薄膜過濾法比較，對測定結果沒有影響。而且，如果過濾法操作不夠快速，乙醇揮發，易影響測定結果；

在做中藥材的浸出物的檢測時，一定要按標準控制好溶劑的濃度（如乙醇等），否則檢驗結果會差異很大；

當液相鑒別中供試品與對照品出峰時間不一致，無法判斷是否合格時，可用對照品與供試品各半配成混合溶液后進樣，若峰寬未變寬，未出現駝峰，即可判斷為合格；

做原料殘留物檢測的時候，如果主成分對雜質有干擾，現有方法無法檢出，需要自己建方法的話，要優先考慮利用理化性質將雜質分離出來再進行測定。往往有意想不到的效果；

用薄層色譜法鑒別時應該考慮展開劑的溫度與配制順序，有時會影響色譜的結果；

薄層色譜鑒別時飽和時間一定要夠。做有機溶劑殘留量檢查時,可以不拘泥于規定的色譜柱, 通常的DB-624可以滿足要求, 取樣量也可以靈活調整, 標準溶液濃度根據限度做相應調整就可以了；

在采用HPLC法測物質含量時，如若流動相中用了緩沖鹽，一定要注意其pH值，放置過程中可能會產生變化，而某些檢測成分對這種變化很敏感；

用HPLC法測物質含量時，溫度的控制極其重要，最好用有柱溫箱的，如果沒有就要裝空調保持恒溫后再測定，否則會出現基線飄移，結果不準確；

在使用微量移液槍時,要注意"重壓輕打",加液會更準確；

提取分液時如兩相的分界不清，可加少量的飽和氯化鈉。分層處會比較明顯。另外，用電吹風對分液漏斗加溫或用熱抹布敷，可以加速其分層；

呋喃唑酮溶解很慢，溶解時間一定要長一點；

用HPLC法測物質含量時，樣品最好用流動相溶解，否則容易產生干擾峰，影響結果，特別有可能出現倒峰，一定要注意；

使用含有緩沖鹽的流動相，容易堵塞管路和柱子，甚至檢測器，如果檢測器堵了，最好先不要拆，使用10%甲醇水超聲加熱一下作為流動相，慢慢小流量沖洗。效果很明顯；

非水滴定中，試劑的含水量對結果有較大影響，如更換不同品牌的試劑，試驗結果會出現不同結果；

比較稠或量少的溶液需要用濾紙過濾時，可以先通過離心的方法使之分層，再去過濾。這樣可以加快過濾，減少有機溶劑的揮發（環境溫度高時）；

用高效液相色譜儀檢測人參、麻黃的含量時因檢測波長為邊緣波長（203、207nm）往往一次不能成功，特別是使用一段時間后的檢測器。可卸掉色譜柱，直接連接檢測器，用0.1%的鹽酸清洗檢測池4小時，效果會好些；

用高效液相色譜儀測定含量時，用色譜純試劑處理對照品和樣品，可減少誤差；

HPLC檢測中，梯度條件容易產生干擾峰，可嘗試通過以下幾種方法規避：

1）：使用重蒸后的水或用市售的純凈水（屈臣氏的比較好）；

2）：盡量選用高波長下檢測；

3）：梯度程序盡量平緩；

4）：樣品濃度選用線性范圍內的最高點；

在作澄明度檢查、可見異物或者不溶性微粒檢查時，不可以用超聲波助溶，否則有些東西就被分解了，什么也檢測不到了；

在做溶出度實驗時，規定藥液需經0.8μm的濾膜濾過，但采用液相檢測時，進柱前樣品還要經0.45μm的濾膜，此時，可以省略第一步過濾，直接做進柱前的樣品過濾，否則濾膜會對樣品產生吸附，使檢測結果偏低。另外不同生產廠家的濾膜對樣品的吸附不同，在檢測時一定要要注意，可用對照品先做一個過濾前后的對比試驗，檢查濾膜的吸附；

在做有機溶劑殘留市要注意載氣流速一般柱流速在1—3mL較好，太大樣品重復性不好，尾吹氣流量也需注意；

在檢驗純化水硝酸鹽項目時一定要冰浴，加硫酸的速度也要控制不能快（快了會使對照和樣品的顏色都很深）也不能太慢（不能讓試液冷卻），要趁熱拿去水浴加熱；

使用HPLC的過濾裝置時，一定要注意慮膜的材質，如果是“羥甲基纖維素”不可以過濾含有機相的液體，否則就溶解了，有機相過濾要使用聚四氟乙烯的；

在做不溶性微粒的時候是可以進行超聲的，可以進行30秒的超聲。特別是象凍干粉針這樣的品種，進行超聲或者放置可以使不溶性微粒的數值減小，大家可以實驗一下，放置后數據明顯降低；

高效液相色譜梯度洗脫時，使用梯度條件情況下，在做第一針樣品前，最好走一個空梯度，這樣保留時間會一致些；

分析鹽酸金剛烷胺片含量時，加溶劑后最好在50℃的水浴中加熱溶解，因為金剛烷胺溶解度受溫度影響；

在做實驗前，要對你做的實驗的安全性，實驗中可能會出現的問題，做到心中有數特別是對具有危險性的實驗，更要做好一切準備，像防火，防爆炸等。化學實驗畢竟是有危險的，要時時注意特別要規范操作在沒有弄明白之前，最好不要輕易動手；

用薄層層析法時，很多樣品因為含有羧基或者氨基會造成跑板拖尾現象或者重疊，這將難以和標準品比對。建議大家在含羧基的樣品中可在展開劑里面加少量羧酸，含氨基的樣品可以在展開劑里面加少量三乙胺；

做油性基質提取時,由于受溫度影響嚴重,常出現乳化現象,分層時間長,可上離心機只要幾分鐘；

有人誤將濃硝酸（在空氣中有“發煙”現象）作為“發煙硝酸”使用，進行硝化－氫氧化鉀呈色鑒別反應，結果不能得到正確的顏色反應，造成假陰性結果。該呈色反應的機理為利用樣品的水解產物莨菪酸，經發煙硝酸加熱硝化為三硝基衍生物，在氫氧化鉀的醇溶液中形成醌型化合物而呈色。“發煙硝酸”是指含HNO3達86－97.5%以上的濃硝酸。而“濃硝酸”雖有"發煙"現象，但其HNO3僅為69%－71%，用于上述呈色反應，會因為硝酸濃度不足而使反應不完全，形成假陰性結果；

一般的鹽溶解，可采用超聲波加快溶解速度。尤其對一些需要加熱再冷卻的樣品；

做薄層鑒別方法研究時，有時候對照品斑點與樣品相應斑點位置不一致，可以在樣品點上加點對照品，注意點圓心要重合等，在相同方法展開，如果在相應位置上沒有出現兩個斑點，則認為是同樣的物質斑點；

在用HPLC做定量檢測時，柱溫和流動相的比例要盡量保持一致，否則保留時間和積分面積會發生變化，影響最終的檢測結果；

一個同事用燒瓶提取樣品時加了塞，并特意未將塞子蓋緊，以為可以放氣，結果由于無法放氣導致爆沸，里面的藥液全部沖到天花板上，還好旁邊沒人哦。所以做實驗室且不可大意，還是小心謹慎為好；

超聲溶解難溶鹽類，可加快溶解速度。特別對一些不適合加熱的樣品；

看到美國藥典的對照品干燥通常規定具體時間3到5小時，我們也應該采用這種方法而不是干燥到恒重；

做薄層分析時，最好將薄層板兩邊的硅膠層切掉2mm，這樣，在展開時可以消除邊緣效應，使展開效果更好；

在做HPLC時，假如發生重疊峰的現象，通常可以嘗試以下幾種方法：

1）、改變流動相成分，如乙腈相改為甲醇相；

2）、調整流動相比例；

3）、調整流動相pH值；

4）、梯度洗脫；

做含量測定時，若對照品規定干燥時，一定要照規定方法干燥，否則測出的含量會差別很大，若沒規定干燥時，參照2005年版范例應用五氧化二磷干燥，否則測出的含量也會差別很大，別認為是剛買的就忽視這一點，隨便試幾個對照品就知道了，結果差很多的；