目前國家對水質急性毒性限值及檢測都有相應的標準,水質急性毒性目前有斑馬鮰魚卵和發光細菌等幾種方法。而發光細菌法指的是水樣在一定的時間和條件下與發光細菌接觸后,發光細菌的發光強度變化與水樣中毒性組分總濃度呈負相關關系,通過生物發光光度計測定水樣與發光細菌接觸一定時間后的發光抑制率來表征水樣的急性毒性水平。
1.實驗室超純水,常溫保存。
2.氯化汞母液(2000mg/L)。
3.復蘇稀釋液(0.85%的氯化鈉溶液)。
4.滲透壓液(17%的氯化鈉溶液)。
5.青?;【鶴67。
生物發光光度計技術規格:可探測光譜范圍,320nm~1000nm;探測結果范圍,0~65535 RLU ;最快檢測時間,5min;相對發光強度,0-200%;可進行ATP測試;測試試管,規格為5ml的反應試管和10ml的測試試管。
室溫20-25℃,同一批樣品在測試過程中要求溫度波動不超過±1℃。且所有測試器皿及試劑,溶液測前1h均置于控溫的測試室內。
若需測定包括pH影響在內的急性毒性,不應調節水樣pH。
若需測定排除pH影響在內的急性毒性,需將水樣和復蘇液(氯化鈉0.85g/100ml)pH測前調至下值:主要含銅的水樣為4.5,主要含其他金屬水樣為5.4,主要含有機化合物水樣為7.0。
與塑料或鐵制試管架上按以下要求排列試管架:
第一排,依次為反應管01-標準品、反應管02-陰性/陽性質控和反應管03-水樣;
第二排,依次為測試管01-標準品、測試管02-陰性/陽性質控和測試管03-水樣。
從冷凍環境(-18℃)中取出青?;【鶴67凍干粉(含量約為0.0015-0.0018g)小瓶,在常溫環境(25℃左右)下放置15min后,啟開并輕敲小瓶,確保凍干細菌充分落在小瓶底部。移取0.5mL0.85%的復蘇液或3%的復蘇液至菌種中,搖勻,放置10min后可以使用。
打開生物發光光度計電源,預熱15min,調零,備用。
分別往三支反應試管中加入2ml的標準品(稀釋液),2ml(1:19-稀釋液:樣品)的陰性質控及2ml(1:19-稀釋液:樣品)的被測水樣;
待凍干粉復蘇時間到后,分別往反應管中加入50ul凍干粉復蘇試劑(注意混勻);
混勻后,等待15min反應時間;
分別從反應試管中移取350ul混合液至測試管中(注意盡量不要濺到瓶壁上);
將測試試管按順序分別放入到主機中,最終結果以RLI%發光強度表示。